Primer Premier Win10是一款非常專業(yè)的引物設(shè)計(jì)軟件，該軟件支持引物設(shè)計(jì)、限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)分析和DNA基元(motif)查找等功能，真正做到快速化和自動(dòng)化操作流程，帶來無與倫比的設(shè)計(jì)體驗(yàn)，并且該版本為破解版，內(nèi)置破解補(bǔ)丁，免激活碼即可永久免費(fèi)進(jìn)行使用。

【功能特色】

　　1、主要界面可分為序列編輯窗口（Genetank），引物設(shè)計(jì)窗口（Primer Design），酶切分析窗口（Restriction Sites）和紋基分析窗口（Motif）四大塊

　　2、該軟件就是用來進(jìn)行引物設(shè)計(jì)的

　　3、可以簡單地通過手動(dòng)拖動(dòng)鼠標(biāo)以擴(kuò)增出相應(yīng)片段所需的引物

　　4、在手動(dòng)的任何時(shí)候，下面顯示各種參數(shù)的改變和可能的二聚體、異 二聚體、發(fā)夾結(jié)構(gòu)等。也可以給定條件，讓軟件自動(dòng)搜索引物，并將引物分析結(jié)果顯示出來

　　5、進(jìn)行這些操作非常簡單

【破解教程】

　　1、下載軟件壓縮包文件，點(diǎn)擊“PP624Installer.exe”根據(jù)提示完成原版安裝即可

　　2、關(guān)閉軟件，將crack文件夾下的patcher.jar文件復(fù)制到Premier 6安裝根目錄下…\http\Dwww.premierbiosoft.com\P80\DMIUpdater\DMPP\DM624文件夾中。

　　默認(rèn)目錄為：C:\Program Files\Primer Premier 6.24

　　3、在開始菜單—運(yùn)行中輸入CMD，打開命題提示符窗口

　　4、用CD命令定位至目錄：

　　cd C:\Program Files\Primer Premier 6.24\http\Dwww.premierbiosoft.com\P80\DMIUpdater\DMPP\DM624

　　7、然后在光標(biāo)后輸入：java -jar patcher.jar ，回車即可破解成功

【使用技巧】

　　一、限制性酶切點(diǎn)分析及基元查找功能

　　1.其主要功能在主界面上一目了然。限制性酶切點(diǎn)分析及基元查找功能比較簡單，點(diǎn)擊該功能按鈕后，選擇相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶或基元（如-10 序列，-35 序列等），按確定即可

　　2.常見的限制性內(nèi)切酶和基元一般都可以找到,你還可以編輯或者添加新限制性內(nèi)切酶或基元

　　二、引物設(shè)計(jì)

　　1.打開DNA序列后點(diǎn)擊按鈕primer，出現(xiàn)“search criteria”窗口，有多種參數(shù)可以調(diào)整

　　2.搜索目的（Seach For）有三種選項(xiàng)，PCR 引物（PCR Primers）、測序引物（Sequencing Primers）和雜交探針（Hybridization Probes）

　　3.搜索類型(Search Type)可選擇分別或同時(shí)查找上、下游引物（Sense/Anti-sense Primer，或Both），或者成對(duì)查找（Pairs），或者分別以適合上、下游引物為主（Compatible with Sense/Anti-sense Primer）。另外還可改變選擇區(qū)域（Search Ranges），引物長度（Primer Length），選擇方式（Search Mode），參數(shù)選擇（Search Parameters）等等

　　3.使用者可根據(jù)自己的需要設(shè)定各項(xiàng)參數(shù)。如果沒有特殊要求，建議使用默認(rèn)設(shè)置。然后按search，隨之出現(xiàn)的Search Progress 窗口中顯示Search Completed 時(shí)，再按OK，這時(shí)搜索結(jié)果以表格的形式出現(xiàn)，有三種顯示方式，上游引物（Sense），下游引物(Anti-sense)，成對(duì)顯示(Pairs)。默認(rèn)顯示為成對(duì)方式，并按優(yōu)劣次序（Rating）排列，滿分為100，即各指標(biāo)基本都能達(dá)標(biāo)

　　三、引物點(diǎn)擊

　　1.點(diǎn)擊其中一對(duì)引物，如第1#引物，并把上述窗口挪開或退出，顯示“Peimer Premier”主窗口，所得結(jié)果分三部分，

　　2.模板及產(chǎn)物位置，中間是所選的上下游引物的一些性質(zhì)，最下面是四種重要指標(biāo)的分析，包括發(fā)夾結(jié)構(gòu)（Hairpin），二聚體（Dimer），錯(cuò)誤引發(fā)情況（False Priming），及上下游引物之間二聚體形成情況（Cross Dimer）

　　3.當(dāng)所分析的引物有這四種結(jié)構(gòu)的形成可能時(shí)，按鈕由變成，點(diǎn)擊該按鈕，在左下角的窗口中就會(huì)出現(xiàn)該結(jié)構(gòu)的形成情況

　　4.一對(duì)理想的引物應(yīng)當(dāng)不存在任何一種上述結(jié)構(gòu)，因此最好的情況是最下面的分析欄沒有，只有。值得注意的是中間一欄的末尾給出該引物的最佳退火溫度

　　四、引物修飾編輯

　　1.在需要對(duì)引物進(jìn)行修飾編輯時(shí)，如在5’端加入酶切位點(diǎn)，可點(diǎn)擊，然后修改引物序列

　　2.若要回到搜索結(jié)果中，則點(diǎn)擊按鈕。如果要設(shè)計(jì)簡并引物，只需根據(jù)源氨基酸序列的物種來源選擇前述的八種遺傳密碼規(guī)則，反推至DNA 序列即可3.對(duì)簡并引物的分析不需像一般引物那樣嚴(yán)格

　　4.總之，“Premier”有優(yōu)秀的引物自動(dòng)搜索功能，同時(shí)可進(jìn)行部分指標(biāo)的分析，而且容易使用，是一個(gè)相當(dāng)不錯(cuò)的軟件